با یک مقاله آموزشی دیگر تحت عنوان اجزای دستگاه HPLC در خدمتتون هستیم.

اجزای دستگاه HPLC

سیستم HPLC عمدتاً از یک پمپ تزریق، یک نمونه‌گیر، یک ستون کروماتوگرافی یا ستون HPLC، یک آشکارساز و یک دستگاه ضبط و پردازش داده تشکیل شده است. در میان آنها، پمپ تزریق، ستون کروماتوگرافی و آشکارساز اجزای کلیدی هستند. علاوه بر این، دستگاه شستشوی گرادیان، گاززدایی آنلاین، نمونه‌برگیر خودکار، ستون پیش ستون یا محافظ، و کنترل‌کننده دمای ستون نیز می‌توانند در صورت نیاز پیکربندی شوند. ابزارهای مدرن HPLC دارای یک سیستم کنترل میکرو کامپیوتری برای کنترل خودکار ابزار و پردازش داده ها هستند.

1. سیستم تزریق

پمپ های تزریق با توجه به فاکتورهای مایع خروجی ثابت به پمپ های فشار ثابت و پمپ های جریان ثابت طبقه بندی می شوند. عملکرد پمپ به طور مستقیم بر کیفیت کل سیستم و قابلیت اطمینان نتایج تجزیه و تحلیل تأثیر می گذارد.

2. دستگاه گاز زدایی

حباب‌ها اغلب در محلول فاز متحرک به دلیل اکسیژن محلول یا هوای مخلوط دیده می‌شوند. ورود حباب‌ها به آشکارساز می‌تواند منجر به پیک نویز شدید در کروماتوگرام شود. حباب های کوچک به آرامی جمع می شوند و به حباب های بزرگ تبدیل می شوند. هنگامی که حباب های بزرگ وارد مسیر جریان یا ستون کروماتوگرافی می شوند، سرعت جریان فاز متحرک کاهش می یابد یا سرعت جریان ناپایدار می شود و باعث نوسان خط پایه می شود. دفع این حباب ها پس از ورود به ستون زمان می برد. در حال حاضر، متداول‌ترین دستگاه‌های گاززدایی فاز متحرک در کروماتوگرافی مایع، گاززدایی با ارتعاش اولتراسونیک آفلاین، گاززدایی آنلاین حباب‌دار گاز بی‌اثر و گاززدایی با خلاء آنلاین هستند.

3. دستگاه شستشوی گرادیان

HPLC دارای دو روش شستشوی ایزوکراتیک و گرادیان است. شستشوی ایزوکراتیک به این معنی است که ترکیب فاز متحرک در طول همان چرخه آنالیز ثابت می ماند که برای نمونه هایی با تعداد اجزای کم و تفاوت کمی در خواص مناسب است. شستشوی گرادیان برنامه ای برای کنترل ترکیب فاز متحرک در یک چرخه تجزیه و تحلیل، مانند قطبیت حلال، قدرت یونی و مقدار pH است. برای تجزیه و تحلیل نمونه های پیچیده با تعداد اجزای زیاد و تفاوت های زیاد در خواص استفاده می شود. استفاده از شستشوی گرادیان می تواند زمان تجزیه و تحلیل را کوتاه کند، وضوح را افزایش دهد، شکل پیک را بهبود بخشد و حساسیت تشخیص را افزایش دهد، اما اغلب باعث رانش خط پایه و کاهش تکرارپذیری می شود.

4. سیستم نمونه گیری

در حال حاضر از شیر تزریق شش پورت یا نمونه گیری خودکار استفاده می شود. این دستگاه نمونه برداری باید دارای سفتی خوب، حجم مرده کوچک و تکرارپذیری خوب باشد. دو روش نمونه برداری برای شیر شش پورت، روش پر کردن جزئی و روش پر کردن کامل وجود دارد.

اجزای دستگاه HPLC

5. سیستم جداسازی

سیستم جداسازی شامل یک ستون کروماتوگرافی، یک ستون محافظ و یک کوره ستونی است.

6. آشکارساز

آشکارساز وسیله ای است که برای نظارت مداوم بر ترکیب و تغییرات محتوای پساب جدا شده توسط ستون کروماتوگرافی استفاده می شود. این آشکارساز به حساسیت بالا، نویز کم (یعنی غیر حساس به تغییرات خارجی مانند دما و جریان)، محدوده خطی وسیع، تکرارپذیری خوب و دامنه کاربرد وسیع نیاز دارد.

7. سیستم پردازش داده ها

این سیستم می‌تواند داده‌های آزمایشی را جمع‌آوری، ذخیره، نمایش، چاپ و پردازش کند تا جداسازی، آماده‌سازی یا شناسایی نمونه به درستی انجام شود.