ستون hplc + ستون کروماتوگرافی

ستون hplc (ستون اچ پی ال سی)

ستون HPLC یا کروماتوگرافی مایع : کروماتوگرافی مایع با عملکرد بالا (به انگلیسی : و مخفف  High performance liquid Chromatography)، که با عنوان کروماتوگرافی مایع با فشار بالا (High pressure liquid chromatography) مشهور و شناخته شده است. یکی از متداول ترین و مهم ترین روش های کروماتوگرافی موجود در شیمی تجزیه است، که جهت جدا کردن اجزای یک مخلوط، شناسایی و اندازه گیری هر جز به کار برده می شود.  و کاربرد فراوانی در تحقیقات و  صنعت هایی مختلف همچون آرایشی، دارویی، غذایی و… دارد. در ادامه به معرفی بیشتر کروماتوگرافی HPLC، کاربرد، انواع، قیمت خرید ستون کروماتوگرافی و فروش خواهیم پرداخت. جهت کسب اطلاعات بیشتر، در مورد قیمت ستون کروماتوگرافی همراه طبیب شیمی باشید.

مجموعه طبیب شیمی برای اولین بار، اقدام به ساخت ستون های  HPLC در ایران نموده است. قیمت مصرفی این محصول زیر قیمت بازار است.  جهت کسب اطلاعات بیشتر در مورد خرید و فروش ستون کروماتوگرافی ایرانی و وارداتی با کارشناسان ما در ارتباط باشید.

لیست ستون کروماتوگرافی ایرانی موجود

جهت اطلاع از انواع قیمت های ستون hplc ایرانی با ما در تماس باشید.

فهرست مطالب

• • ستون HPLC (کروماتوگرافی HPLC) چیست ؟
  • تاریخچه
  • انواع کروماتوگرافی
  • دسته بندی کروماتوگرافی براساس قطبیت نسبی فاز متحرک و ساکن
  • کارکرد
  • انواع ستون hplc
  • ستون HPLC گرادیانی
  • ستون HPLC تبادل یونی (IEC)
  • ستون های HPLC فاز معکوس
  • کاربرد کروماتوگرافی فاز معکوس
  • ستون های HPLC فاز نرمال
  • موارد استفاده و کاربرد ستون کروماتوگرافی فاز مایع
  • قسمت های اصلی دستگاه کروماتوگرافی مایع با عملکرد بالا
  • کاربرد
  • کروماتوگرافی مایع با عملکرد فوق العاده بالا (UPLC)
  • فروش ستون اچ پی ال سی ایرانی
  • قیمت ستون اچ پی ال سی ایرانی
  • سوالات متداول

ستون HPLC – اچ پی ال سی (کروماتوگرافی HPLC) چیست ؟

کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا ((High-performance liquid chromatography، نوعی سوانگاری (کروماتوگرافی) مایع است، که در آن فاز مایع به آسانی تغییر و بر زمان تجزیه و قدرت تفکیک تاثیر گذار است. کروماتوگرافی مایع کارا در پمپ های متکی به عبور یک حلال مایع تحت فشار، حاوی مخلوط نمونه است. ستون با  ماده جاذب جامد پر شده است.  برخورد هر عنصر در نمونه موجب افزایش سرعت جدایی اجزای آن ها به صورت جریان از ستون می شود.

در کروماتوگرافی مایع، فاز متحرک مایع است و فاز ثابت ممکن است مایع یا جامد باشد.  در ابتدا، نمونه در یک حلال حل شده و سپس وارد ستون می‌شود و تحت فشار بالا جریان می‌یابد. انواع مختلفی از برهم کنش‌ها و نیروهای مولکولی در فرایند بازداری مؤثر هستند. کروماتوگرافی مایع بر اساس نیروهای مؤثر و در نتیجه مکانیسم جداسازی و نوع فاز ساکن به انواع :

کروماتوگرافی تقسیمی (Partition chromatography)، کروماتوگرافی جذب سطحی (Adsorption chromatography)، کروماتوگرافی تعویض یونی (Ion-exchange chromatography)، کروماتوگرافی اندازه-طردی (Size-exclusion chromatography)، کروماتوگرافی کایرال (Chiral chromatography) و کروماتوگرافی افینیته (Affinity chromatography) تقسیم می‌شود. کروماتوگرافی تقسیمی کاربرد بیشتری نسبت به سایر انواع دارد و جداسازی حل شونده‌ها بر مبنای قابلیت متفاوتشان در تقسیم بین فاز متحرک و ساکن استوار است.

سایر اسامی : ستون HPLC، ستون اچ پی ال سی، ستون کروماتوگرافی، کروماتوگرافی HPLC  ،HPLC، کروماتوگرافی مایع، کروماتوگراف، اچ پی ال سی، hplc، ستون

و در نهایت توصیه می کنیم جهت کسب اطلاعات بیشتر مقاله ” روش های کروماتوگرافی ” را مطالعه بفرمایید.

تاریخچه تولید ستون کروماتوگرافی

کروماتوگرافی را، میخاییل تسوت، اولین بار در سال 1906 در روسیه کشف کرد. وی بیان کرد که می توان از کروماتوگرافی، برای جذب و جداسازی سایر موارد نیز  استفاده کرد.

کروماتوگرافی از دو بخش کروماتو (به معنی رنگ) و گرافی (به معنی تفکیک) تشکیل شده است.

HPLC مخفف  High performance liquid Chromatography است. 

کلمات مورد استفاده

• *فاز متحرک (Mobile Phase)
• *فاز ثایت (مواد موجود در ستون ، اغلب از جنس خاک دیاتومه هستند)
• *نمونه
• *زمان بازداری (Retention Time)

انواع کروماتوگرافی

انواع اصلی آن، به بخش های زیر تقسیم می شود.

• *کروماتوگرافی مایع – جامد (شامل جدب سطحی، لایه نازک، تبادل یونی، ژلی)
• *کروماتوگرافی گاز-جامد
• *کروماتوگرافی مایع-مایع (شامل کروماتوگرافی تقسیمی، کروماتوگرافی کاغذی)
• *کروماتوگرافی گاز-مایع (شامل کروماتوگرافی ستون مویین)

دسته بندی کروماتوگرافی براساس قطبیت نسبی فاز متحرک و ساکن

• *کروماتوگرافی فاز نرمال  (Normal phase)
• *کروماتوگرافی فاز معکوس (Reverse phase)

کارکرد و نحوه شست و شو ستون hplc

مخلوط نمونه به منظور جداسازی و آنالیز، در حجم کم گسسته (معمولاً میکرولیتر)، به جریان فاز متحرک که از طریق ستون عبور می کند وارد می شود. اجزای نمونه با سرعت های مختلف از  طریق ستون حرکت می کنند. (که به آن فاز ساکن نیز گفته می شود). سرعت هر مولفه به ماهیت شیمیایی، ماهیت فاز ساکن (ستون) و به ترکیب فاز متحرک بستگی دارد.

ذرات جاذب ممکن است ماهیت آبگریز یا قطبی داشته باشند. فازهای متحرک متداول مورد استفاده هر ترکیب، شامل مخلوط آب با حلال های آلی مختلف (متداول ترین آنها استونیتریل و متانول) است. برخی از روش های HPLC ، از فاز متحرک بدون آب استفاده می کنند. ترکیبات آبی فاز متحرک شامل اسید (مانند اسید فرمیک، فسفریک یا تری فلوئوراستیک) است. و به جداسازی اجزای نمونه کمک می کنند.

انتخاب ترکیب فاز متحرک به اجزا مختلف نمونه (آنالیت) و فاز ثابت وابسته است. باتوجه، به میل آنها برای فازهای ثابت و متحرک، در طول فرآیند جداسازی در ستون، آنالیز فازهای ثابت و متحرک را انجام می دهند.

بیشتر بدانید : نحوه شست و شو ستون hplc چگونه است ؟ 

انواع ستون HPLC کروماتوگرافی

اخیرا، طیف گسترده ای از انواع ستون های کروماتوگرافی برای کاربردهای مختلف تجزیه ای در دسترس است. انواع ستون ها شامل موارد زیر است.

• *ستون تبادل یونی
• * ستون های اچ پی ال سی فاز معکوس
• * ستون فاز نرمال
• * ستون طرد غربالگری
• *ستون تعویض یونی
• *کروماتوگرافی آبگریز
• *کروماتوگرافی تمایلی

در مورد ستون کروماتوگرافی شیشه ای بیشتر بدانید.

ستون HPLC گرادیانی

این دسته از ستون ها (کروماتوگرافی گرادیانی یا فشار کم)، قادر به تحمل فشار بالا نمی باشند. متداول ترین موارد پر شده این گروه، شامل موارد زیر است.

• *سیلیس (هیدروکسی آپاتیت)
• *رزین پلیمری (پلی استایرن دی وینیل بنزن)

حلقه با قطر کوچکتر، موجب افزایش حساسیت جداسازی می شود. با این وجود، با کاهش قطر حلقه در دبی مشخص، فشار ستون افزایش می یابد و یک حد پایین برای اندازه حلقه ایجاد می شود. قطر حلقه میانی برای یک ستون تجزیه ای اچ پی ال سی معمولا در محدوده 1.8-5 میکرومتر است. ستون های اولیه اچ پی ال سی با ذرات سیلیکا به شکل نامنظم پر می شدند. زیرا این عمل موجب افزایش سطح می شد.

در حال حاضر، سیلیکا متخلخل کروی برای اکثر موارد جایگزین سیلیکای نامنظم شده است. شکل کروی باعث افزایش کارایی و کاهش فشار می شود و تخلخل باعث افزایش سطح می شود. رزین های پلیمری دارای تعداد زیادی پیوند های عرضی هستند. و برای جداسازی در مواردی که pH خارج از محدوده عملیاتی پرکننده ای سیلیکا می باشد بسیار مفید است. جهت اطلاع از قیمت فیتینگ ستون ایرانی کلیک کنید.

ستون HPLC تبادل یونی (IEC)

IEC، یکی از انواع روش های کروماتوگرافی مایع است، که از نظر دستگاه، اجزا و وظایف مشابه روش کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا هستند. که کاربرد زیادی در جداسازی انواع مختلف آنالیت، جداسازی کربوهیدرات، اسیدهای آمینه و پروتئین ها دارد. کروماتوگرافی تبادل یونی و تبادل لیگاند ممکن است در یک ستون ترکیب شود. در ستون های حالت ترکیبی، تبادل یونی معمولا از طریق یون های فلزی انجام می شود. لیگاند ها از طریق مولکول های دهنده الكترون مانند گروه های هیدروکسیل یا آمین ها تبادل می کنند. این نوع ستون اچ پی ال سی، اغلب برای جداسازی مونوساکاریدها استفاده می شوند.

ستون های HPLC فاز معکوس

ستون HPLC فاز معکوس، یکی از متنوع ترین و اصلی ترین ستون ها است، که در طیف گسترده ای از انواع مختلف آنالیت ها به کار برده می شوند. ذرات پرکننده، ستون های HPLC فاز معکوس غیر قطبی هستند. حلال آلی آبی و محلول در آب، دو فاز متحرک مورد استفاده این ستون هستند.

کاربرد کروماتوگرافی فاز معکوس

ستون کروماتوگرافی در موارد زیر استفاده می شود.

• *انواع داروها
• *ویتامین های محلول در آب
• *ویتامین محلول در چربی
• *اسیدآمینه
• *اسید چرب
• *آنزیم

و…

ستون های HPLC فاز نرمال

در این روش مواد پرکننده فاز ساکن و متحرک، به ترتیب قطبی و غیر قطبی هستند.  به صورتی که ستون را با ذرات قطبی معدنی پر و از یک فاز متحرک ناقطبی به منظور عبور از فاز قطبی استفاده می کنند. معمولا، حلال مورد استفاده در این روش یک حلال آلی مانند هگزان یا متیلن کلراید است.

این روش به طور گسترده، جهت خالص سازی نمونه های خام، مولکول های کوچک مانند اسیدهای آلی، برخی داروها و طیف وسیعی از مولکول های زیستی از جمله پروتئین های گلیکوزیله استفاده می شوند.

موارد استفاده و کاربرد ستون کروماتوگرافی فاز مایع

از جمله این کاربردها می توان به موارد زیر اشاره کرد :

• *دارو
• *قند
• *ویتامین های محلول در آب
• *داروهای شیمی درمانی

و…

 اصول ستون کروماتوگرافی

خصوصیات فیزیکی آنالیت ها، تعیین کننده مناسب ترین ستون اچ پی ال سی برای جداسازی است. از جمله این خصوصیات می توان به موارد زیر اشاره کرد.

• *آب دوستی / آبگریزی
• *نیروهای بین مولکولی (دوقطبی-دوقطبی)
• *نیروهای درون مولکولی (یونی)
• *اندازه مولکول
• به طور کلی، ساختار و فاز ساکن مشخصات آنالیت را تعیین می کند.

قسمت های اصلی دستگاه کروماتوگرافی مایع با عملکرد بالا

قسمت های اصلی دستگاه HPLC شامل موارد زیر است.

• *مخازن حلال
• *پمپ
• *تزریق کننده نمونه
• *ستون
• *آشکارساز

که در ادامه به توضیح آن ها می پردازیم.

مخازن حلال : هر دستگاه مجهز به یک یا چند مخزن شیشه ای با گنجایش 500 میلی لیتر  است. که وظبفه آن پمپاز حلال است.

پمپ :  پیستونی رفت و برگشت  (Reciprocating Piston pumps)، پمپ جابجایی یا سرنگی (Screw driven syringe pump)،  پمپ بادی (Pneumatic pumps)، سه نوع پمپ متداول مورد استفاده در کروماتوگرافی مایع با عملکرد بالا هستند.  که به دو روش ایزوکراتیک (Isocratic) و گرادیانی عمل می کنند.

تزریق کننده نمونه : تزریق، جهت وارد کردن نمونه به فاز متحرک استفاده می شود. ترزیق سرنگی و حلقه های نمونه بردار، به ترتیب متداول ترین و ساده ترین روش وارد کردن نمونه در کروماتوگرافی مایع است.

ستون :  عمدتا، ستون کروماتوگرافی مایع، از لوله های فولاد ضد زنگ با منفذ یکنواخت  با طول 10 الی 30 سانتی متر و قطر داخلی 4 الی 10 میلی متر ساخته می شوند. ستون (column)، مرکز جداسازی اجزای نمونه است.

• *آشکارساز : دتکتور، گستره وسیعی از وسایل پیچیده و حساس هستند، که به حضور اجزا موجود در فاز متحرکی که از ستون خارج می شوند، پاسخ الکتریکی مناسبی می دهند.

در مورد اجزای دستگاه hplc بیشتر بدانید

کاربرد و موارد استفاده از ستون کروماتوگرافی

• *صنعت پزشکی (داروسازی)

استفاده پزشکی از اچ پی ال سی می تواند شامل تجزیه و تحلیل دارو باشد، اما بیشتر در گروه تجزیه و تحلیل مواد مغذی قرار می گیرند. این روش، از دقت بالایی برخوردار است. ولی ابزاری گران قیمت است. قیمت ستون کروماتوگرافی را طبیب شیمی بپرسید.

HPLC ، کاربرد زیادی در علوم آزمایشگاهی و بالینی دارد. اچ پی ال سی، یک روش معمول و کارآمد در صنعت داروسازی است. زیرا، محصول با درصد خلوص بالا را را ارائه می دهد. اچ پی ال سی، محصولات خالص تولید می کند. اما همیشه روش اصلی مورد استفاده در تولید مواد دارویی فله ای نیست. طبق فارماکوپه اروپا، HPLC فقط در 15.5 ٪ از سنتزها کاربرد دارد. با این حال طبق بیانات فارماکوپه ایالات متحده، اچ پی ال سی در 44 % از سنتز ها نقش بسزایی دارد. با این حال، این ماده در 44 ٪ از سنتزها در فارماکوپه ایالات متحده نقش دارد. علت این امر تفاوت در محدودیت پولی و زمانی است. زیرا  HPLC در مقیاس بزرگ می تواند یک روش گران قیمت باشد.

• *صنایع غذایی
• *محیط زیست
• *صنعت
• *پژوهش

این روش بدیهی در مشاهده گونه های مختلف در نمونه های جمع آوری شده نیز مفید است. اما هنگام جستجوی اطلاعات در مورد هویت گونه ها، نیاز به استفاده از راه حل های استاندارد است. این به عنوان روشی برای تأیید نتایج واکنشهای سنتز استفاده می شود. زیرا درصد خلوص در این نوع تحقیقات ضروری است. با این حال، طیف سنجی جرمی همچنان روش مطمئن تری برای شناسایی گونه ها است.

کروماتوگرافی مایع با عملکرد فوق العاده بالا (UPLC)

کروماتوگرافی مایع با عملکرد بالا (Ultra Performance Liquid Chromatography)، روشی است که در آن اندازه ذرات 3-5 میکرومتر و با فشار 400 بار است.

مزیت : سرعت، این روش یکی از مهم ترین و اصلی ترین مزیت این روش نسبت به سایر روش ها است. سایر مزیت های آن عبارتند از :

• *سریع
• *حساس
• *کاهش حجم حلال های آلی

معایب : کاهش عمر ستون، یکی بزرگترین و اصلی ترین مشکل این دستگاه است. زیرا این روش در فشارهای بالا استفاده می شود. خرید ستون کروماتوگرافی را به ما بسپارید. (09919936124)

تولید کننده ستون کروماتوگرافی

فروش ستون اچ پی ال سی ایرانی – خرید ستون کروماتوگرافی

جهت تهیه ستون کروماتوگرافی ایرانی با ما در تماس باشید. ما این محصول را با قیمت باورنکردنی در اختیار شما عزیزان قرار خواهیم داد.

قیمت ستون hplc c18 ایرانی – قیمت ستون کروماتوگرافی

جهت اطلاع از قیمت کروماتوگرافی HPLC، با همکاران ما در واحد فروش مجموعه طبیب شیمی در ارتباط باشید.

سخن پایانی

اصطلاح «ستون hplc» به نظر ترجمه فارسی «ستون HPLC» است. HPLC مخفف High-Performance Liquid Chromatography است که یک تکنیک تحلیلی پرکاربرد برای جداسازی، شناسایی و تعیین کمیت اجزای یک نمونه است. ستون های HPLC اجزای حیاتی سیستم های HPLC هستند و نقش حیاتی در فرآیند جداسازی دارند.

در اینجا توضیح جامعی در مورد ستون های HPLC ارائه می شود.

عملکرد :

ستون های HPLC با مواد فاز ثابت، معمولاً ذرات کوچک با شیمی سطحی خاص، بسته بندی می شوند. همانطور که مخلوط نمونه از طریق ستون جریان می یابد، اجزا بر اساس خواص شیمیایی خود با فاز ساکن برهمکنش متفاوتی دارند. این برهمکنش دیفرانسیل باعث می شود که اجزاء در هنگام خروج از ستون به نوارها یا قله های مجزا جدا شوند.

انواع ستون کروماتوگرافی

انواع مختلفی از ستون های HPLC وجود دارد که هر کدام برای کاربردهای خاصی طراحی شده اند. رایج ترین انواع عبارتند از:

ستون های فاز معکوس : این ستون ها پرکاربردترین ستون های HPLC هستند. آنها از یک فاز ثابت غیر قطبی و یک فاز متحرک قطبی استفاده می کنند. جداسازی بر اساس اصل برهمکنش‌های آبگریز است، که در آن ترکیبات آبگریز بیشتر تمایل بیشتری به فاز ساکن دارند و بعداً شسته می‌شوند.

ستون های فاز عادی : این ستون ها از فاز ثابت قطبی و فاز متحرک غیر قطبی استفاده می کنند. جداسازی بر اساس اصل برهمکنش‌های آبدوست انجام می‌شود، که در آن ترکیبات آبدوست بیشتر تمایل بیشتری به فاز ساکن دارند و بعداً شستشو می‌شوند.

ستون های تبادل یونی : این ستون ها دارای یک فاز ثابت باردار هستند که می توانند با یون های نمونه برهم کنش داشته باشند. آنها برای جداسازی ترکیبات یونی بر اساس بار و قدرت یونی آنها استفاده می شوند.

Size-Exclusion Columns : این ستون ها مولکول ها را بر اساس اندازه شان جدا می کنند. آنها یک فاز ثابت متخلخل با منافذ با محدوده اندازه خاص دارند. مولکول های کوچکتر می توانند وارد منافذ شده و دیرتر شستشو شوند، در حالی که مولکول های بزرگتر حذف شده و زودتر شستشو می شوند.

انتخاب : انتخاب ستون HPLC به ماهیت نمونه، جداسازی مورد نظر و سازگاری با فاز متحرک بستگی دارد. عواملی مانند اندازه ذرات، اندازه منافذ، شیمی سطح و ابعاد ستون هنگام انتخاب ستون مناسب برای یک آنالیز خاص در نظر گرفته می شوند.

به طور خلاصه، ستون‌های HPLC اجزای ضروری سیستم‌های HPLC هستند که جداسازی مخلوط‌های پیچیده را به اجزای جداگانه برای تجزیه و تحلیل و کمی‌سازی امکان‌پذیر می‌سازند. انتخاب ستون مناسب برای دستیابی به جداسازی بهینه و نتایج دقیق در آنالیز HPLC بسیار مهم است.

سوالات متداول